雪卡毒素(也稱西加毒素)中毒慢和是由雪卡毒素（CTXs）引起(qǐ)的，是世界上常見的食物中毒來源之一，資會據調查，CTXs每年大約造成(chéng)5萬人中毒，是造成(c藍靜héng)人類中毒分布最廣、人數最多的一種(zhǒng)海洋毒素之國藍一。目前發(fā)現CTX的類似物有30餘個。

　　雪卡毒素是一種(zhǒng)由底栖甲藻産生的熱穩時林定脂溶性聚醚毒素，在天然樣(yàng)品中以微量存在，當濃度達又子到0.2μg/ kg時(shí)具有在樹神經(jīng)毒性作用，CTXs的半數緻死量（median letha河風l dose，LD 50）爲0.45 μg/kg，比河豚毒素（tetrod煙子otoxin，TTX）的毒性還(hái)要強100倍，是重要的神經(j體如īng)毒素。美國(guó) FDA 和 EFSA 建議控制水技子平爲 0.01 μg CTX1B 當量/kg。

　　根據島津新發(fā)布的一項技術，通過(guò)向(xiàng)流動山票相中添加非常少量的堿金屬（如Na+和Li些短+）來優化一種(zhǒng)使用術林鈉和锂加合物[M+Na]+和[M+Li]+離子檢測CTXs的高靈視錢敏度方法。通過(guò)這(zhè)項技術，可以使用LCM訊民SMS成(chéng)功分離及檢測FDA推薦的低濃度的CTXs。本近鐘文介紹了[M+Li]+新方法的分析條件和準确度。

CTXs标準品

　　1、5種(zhǒng)CTX類似物的标準品由JFRL（日本食品街做分析中心）提供

　　2、9種(zhǒng)CTX類嗎件似物的混标樣(yàng)品由NIHS（日本國(guó)立醫藥品食品衛是睡生研究所）提供

分析條件

　　儀器型号：Nexera X3 UHPLC+LCMS-8060NX

　　分析結果

　　1、[M+Na]+或[M+Li]+離子的形成(ché訊小ng)和碰撞能(néng)（CE）的優化

　　在流動相中添加Na+或Li+會(huì)通過(guò)陽離子化增加體資鈉或锂加合物的形成(chéng)。爲了獲得所需的離子[M+Na]+或[M+Li睡資]+ ，可在流動相中加入微量堿金屬。下圖爲不同流動相南理條件下CTX1B的分析示例，本研究中分析的其他目标化合物也獲得了相同的結討媽果。當向(xiàng)流動相中添加Li+時(shí)，未檢測到 [就務M+Na]+。這(zhè)些結果表明，話線可以通過(guò)使用[M+Li]+等替代離子來森音實現更高的靈敏度。

考察不同流動相條件下CTX1B的分析結為爸果（SIM）

　　但是，[M+Na]+和[M+Li]+母離子沒(méi)有錢裡提供任何有用的産物離子，因此優化CE用以監測[M+Na]+見視>[M+Na]+或[M+Li]+>[M+Li]+在MRM公小分析模式下提供最高的信噪比。CTX1對黑B的優化CE如下表所示。其餘8種(zhǒng)報樂類似物的最佳CE以類似的方式進(jìn)行了優化。

CE與峰面(miàn)積或信噪比之間的關系

　　2、改善色譜峰分離度和靈敏度

　　在下圖中，比較了使用文獻方法、添加Na的流動相（b風麗）和添加Li的流動相（c）對(duì)目标化合物的分技會離。2,3-dihydroxyCTX3C和5通關1-hydroxyCTX3、49-epi-CTX3C和CTX3C、C和信TX4A和CTX4B在新條件下表現出關坐明顯更好(hǎo)的分離。除2,3日子-dihydroxyCTX3C和51-hydroxyCTX3外的6種(zh爸校ǒng)類似物和CTX3C在加Na流動相中具有良好(hǎo)的靈敏度。實驗證爸報實，使用添加Li的流動相時(shí)，9 種(zh員睡ǒng)CTX類似物的靈敏度相當。

9 種(zhǒng)CTX類似物的MRM色譜圖（1 ng/mL NIHS人費混标樣(yàng)品）

　　3、定量限（LOQ）的評估

　　使用JFRL标準品生成(chéng)校準曲線光些，以确認[M+Li]+> [M+Li]+ 。校準曲線最低點的每煙海個色譜圖如下圖所示。确定校準曲線的範圍，使每個校準點的3次重複分析的平均外上準确度爲100±5%，并指定最低點作爲 LOQ。用5 g魚還制肉制備1 mL測定溶液時(sh資章í)，5種(zhǒng)标準品的LOQ範圍爲0.0004至0.00務理12μg/kg。

校準曲線最低點的MRM色譜圖

小結

　　島津最新的技術介紹了一種(zhǒng)通過(guò)向(綠飛xiàng)流動相添加微量堿金屬（如Na+和Li+）來提高資樂CTX檢測靈敏度的方法。這(zhè)項工作成(c樹如héng)功證明了使用LC/MS/MS在低濃度吧務下分離和檢測CTX類似物，符合FDA限度要求。

　　注：本産品僅用于研究，不能(néng)用于醫療診斷目的。